ABSTRACT
In order to develop a high-efficiency and reproducible transformation protocol for Stylosanthes guianensis we assessed the biological and physical parameters affecting plant electroporation protoplasts. Energy input, as combinations of electric field strengths discharged by different capacitors, electroporation buffer and DNA form were evaluated. Transformation efficiency was assayed in vivo as transient reporter gene expression, using the GFP-coding gene mgfp5 driven by a CaMV 35S constitutive promoter. Energy input and electric field strength had a critical influence on transgene expression with higher transformation levels being achieved with 250 V.cm-1 discharged by 900 and 1000 muF capacitors. Linear plasmid DNA, the absence of chloride and the presence of calcium ions also increased transient gene expression, albeit not significantly
Subject(s)
Electroporation , Gene Transfer Techniques , Plants, Genetically Modified , ProtoplastsABSTRACT
Concentraçöes de testosterona foram determinadas por radioimunoensaio em 30 amostras de soro sanguíneo obtidas cinco vezes durante 24 horas, de 6 búfalos adultos Jaffarabadi x Mediterrâneo. As amostras foram obtidas durante um dia do inverno e um dia do veräo de 1991. As concentraçöes de testosterona variaram de 0,10 a 1,36 ng/ml no inverno e de 0,10 a 2,454 ng/ml no veräo. Valores máximos foram obtidos às 6,00 horas (0,52 ng/ml) no veräo e 0,82 ng/ml no inverno, ocorrendo entäo duas quedas abruptas, a primeira às 12 horas (0,37 ng/ml) no veräo e 0,21 ng/ml no inverno e a segunda 24 horas (0,17 ng/ml) no veräo e 0,49 ng/ml no inverno. No veräo, níveis mais altos de testosterona sérica foram observados durante o dia
Subject(s)
Animals , Male , Buffaloes/physiology , Seasons , Testosterone/bloodABSTRACT
Seis búfalos provenientes de cruzamentos entre as raças Jaffarabadi e Mediterrâneo, com aproximadamente 36 meses de idade, foram submetidos a 16 colheitas de sêmen, quinzenalmente, entre os meses de maio a agosto de 1990, por meio de eletroejaculaçäo ou vagina artificial. No sêmen total foram determinadas, em mg/ml, as concentraçöes de frutose e cálcio, enquanto que, na fraçäo rica em espermatozóides, fizeram-se dosagens de GOT e GPT, em ug/ml. Verificou-se que nas amostras colhidas com vagina artificial os valores de frutose foram significantemente maiores, ao passo que, naquelas obtidos por eletroejaculaçäo, predominaram valores mais altos de GOT e GPT. Relativamente ao cálcio, näo houve diferença significativa quanto aos métodos de colheita
Subject(s)
Animals , Male , Buffaloes/metabolism , Semen/chemistryABSTRACT
Foram avaliados os períodos pós-parto de vacas primíparas mestiças Gir x Caracu e Nelore x Caracu, mantidas em regime extensivo de pastagem. Para a determinaçäo dos níveis hormonais de progesterona, amostras de leite foram coletadas semanalmente até que os animais apresentassem o 1§ estro perceptível, quando foram inseminadas artificialmente. Decorridos 21 dias da inseminaçäo, amostras foram coletadas e dosadas para fazer o diagnóstico precoce de gestaçäo. Os resultados mostraram início de ciclicidade ovariana com 9,89 semanas após o parto para vacas Gir x Caracu, com valores médios de progesterona de 0,28 nmol/l no dia do estro e 7,62 nmol/l aos 21 dias após a inseminaçäo. Para vacas Nelore x Caracu, o estro se deu com 12,08 semanas após o parto e com valores médios de progesterona de 0,46 nmol/l e 9,23 nmol/l para o dia do estro e no 21§ dia, respectivamente. Dez gestaçöes de doze diagnosticadas no 21§ dia foram confirmadas por palpaçäo retal, tendo ocorrido um caso de mortalidade embrionária precoce. Outras três vacas foram inseminadas durante a fase luteínica. A eficiência na observaçäo dos estros foi de 52,94 por cento, pois de 34 identificados pelos níveis hormonais, 18 foram percebidos visualmente. A variaçäo entre os cruzamentos näo alterou significativamente o nível de progesterona no dia do estro, tampouco no 21§ dia após inseminaçäo e também quanto ao período necessário ao reinício da atividade ovariana pós-parto